技术摘要：
本发明属于茶叶籽深加工领域，具体公开了一种茶叶籽酚酸的HPEF提取方法，具体包括：原料处理、HPEF提取以及树脂吸附，从而得到了茶叶籽酚酸产品。本发明还解决了现有提取方法效率低、纯度不高、高成本，从而导致酚酸产品DPPH自由基清除能力下降的问题。根据本发明方法  全部
背景技术：
茶树(Camellia  sinensis(L.)O.Ktze.)为山茶科山茶属植物，起源于我国云贵高 原。茶树叶子、果实等植物材料富含茶多酚。酚类化合物是植物中一种重要的次生代谢产 物，其分子结构中含有若干个酚性羟基基团，一般分为酚酸类、黄酮类、单宁类、黄烷醇类和 苷类等。《中华人民共和国药典》说明茶叶籽酚酸类化合物具有降血脂、抗凝、抗氧化、利胆、 抗癌等作用，已有报道采用高效液相色谱法测定茶叶籽单个组分的含量。茶叶籽中的活性 酚酸类物质是多羟基化合物，它的结构特点决定酚酸易溶或可溶于水、醇类、醚类、酮类、酯 类等，因此，溶剂提取法主要有水溶剂提取和有机溶剂提取两种。除此之外，还有微波辅助 提取、超声波辅助提取、生物酶解提取、超临界流体萃取和膜技术提取等《( 一种从火炭母中 提取酚酸类化合物的方法》，专利号：201710418772.0《；柑橘皮渣酚酸防降解绿色高效超声 波提取方法》，专利号：201710432484.0《；薰衣草中的酚酸类化合物及其制备方法和用途》， 专利号：201710131035.2)。茶叶籽酚酸类在生物体中除作结构材料和能源性材料外，更重 要地，还参与了生命现象中细胞的各种活动。酚酸广泛应用于食品、纺织、化妆品和医药领 域等领域，其在生物学上的重要意义决定了它在食品及医药领域有广阔的前景。 高压脉冲电场(HPEF)法是近年发展起来的一种新技术，其机理是利用细胞膜电穿 孔原理在瞬间使细胞破壁，造成细胞膜电位混乱，细胞壁和细胞膜受到可逆或小可逆的破 坏，从而令细胞组分流出，具有处理时间短、能耗低、较不易引起目的产物变性等优点。以提 高茶叶籽酚酸抗氧化活性为目的的HPEF提取方法，能够克服常规乙醇水提取对活性物质带 来的不利影响；利用HPEF提取方法能够加强与样品相接触的溶剂，并破坏其中茶叶籽中的 细胞组分，将所需化合物从样品基体中分离，从而进入溶剂中(《一种采用高压脉冲电场提 取马齿苋多糖的方法》，专利号：201310569144 .4；《一种柑橘精油的提取方法》，专利号： 201610121908 .7；《一种高压脉冲电场辅助亚临界流体萃取米糠油的方法》，专利号： 201410289492.0《；一种从牛蒡根中提取牛蒡多糖的方法》，专利号：201510389114.4)。
技术实现要素：
为了解决现有茶叶籽酚酸提取方法效率低、纯度不高、成本高，从而导致酚酸产品 DPPH自由基清除能力较低的问题，本发明提供了一种茶叶籽酚酸的HPEF提取方法，不仅提 高了提取效率，还提高了产品得率、纯度以及DPPH自由基清除能力。 本发明采用的技术方案如下： 一种茶叶籽酚酸的HPEF提取方法，包括以下步骤： (1)原料处理：将茶叶籽干燥后粉碎过筛得到茶叶籽粉末，再将其溶于乙醇水溶液 得到混合物； (2)HPEF提取：将所述混合物在功率400～600W、电场强度20～30KV/cm、脉宽7～11 3 CN 111544494 A 说　明　书 2/6 页 μs、频率40～68Hz的条件下HPEF处理2～6h，减压过滤、滤渣洗涤后得茶叶籽酚酸粗品； (3)树脂吸附：将所述茶叶籽酚酸粗品稀释后利用大孔树脂吸附并进行水浴振荡， 将吸附得到的大孔树脂过滤并洗涤，待树脂滤干后利用55～65％乙醇动态洗脱，洗脱液浓 缩后真空冷冻干燥，得到茶叶籽酚酸。 本发明通过大量试验，发现不同原料中的酚酸，由于其溶出速率及干扰组分存在 差异，且意外发现采用HPEF提取方法来提取茶叶籽中的酚酸不仅大大提高了提取效率，还 提高了产品得率、纯度以及DPPH自由基清除能力，非常适合工业化大规模生产应用。 步骤(1)中，将茶叶籽干燥至恒重并使其含水率低于0.05％，再粉碎并过90～110 目筛得到茶叶籽粉末。 优选地，步骤(1)中，所述的乙醇水溶液的体积浓度为45～55％。以茶叶籽粉末的 质量计，所述乙醇水溶液的用量为1mg：(50～70)mL。实验表明，在优选的乙醇水溶液的用量 和浓度条件下，茶叶籽酚酸的提取效率更高。 优选地，步骤(2)中，所述HPEF处理的条件为：功率450～550W、电场强度24～26KV/ cm、脉宽8～10μs、频率50～60Hz。实验表明在优选的HPEF参数条件下，提取过程中溶出的杂 质成分少，溶出的有效组分较高。 步骤(2)中，在0.01MPa条件下减压过滤50～70min，得到的滤渣利用体积浓度为45 ～55％的乙醇水溶液洗涤2～3次，合并滤渣即得茶叶籽酚酸粗品。以滤渣的质量计，所述乙 醇水溶液的用量为0.001g：(30～80)mL。 步骤(3)中，所述茶叶籽酚酸粗品加水稀释得到浓度为9.5～10.5mg/mL的溶液。所 述水浴振荡的条件为：然后在20～30℃恒温水浴中振荡7～9h，振荡频率为1000～1400r/ min。 步骤(3)中，所述大孔树脂吸附的流速为2.0～4.0BV/h，吸附时间为1.0～3.0h。所 述动态洗脱的速率为2.0～4.0BV/h。 与现有技术相比，本发明具有以下有益效果： (1)本发明的提取方法适宜工业化生产，提取率高，进一步提高了产品的得率和纯 度； (2)本发明方法得到的茶叶籽酚酸的DPPH自由基清除能力比传统乙醇水溶液提法 提高1.37～2.08倍，明显提高了产品的DPPH自由基清除能力； (3)本发明所使用的溶剂等试剂具有无毒、无害、用量少、成本低的特点，其本发明 工艺简单、无环境污染，具有高效、省时和成本低等优点，是一种绿色环保、前景广阔的茶叶 籽酚酸提取技术。 附图说明 图1为本发明提取茶叶籽酚酸的纯度、得率与清除DPPH自由基能力结果示意图。