
技术摘要:
本发明公开了一种用于布鲁氏菌环介导等温扩增技术检测的引物,包括两条外引物F3和B3、两条内引物FIP和BIP,以及两条环引物LF和LB;本发明还公开了利用上述LAMP引物的布鲁氏菌环介导等温扩增技术可视化检测方法,具体按照以下步骤实施:S1,提取细菌基因组DNA,存放于‑ 全部
背景技术:
布鲁氏菌(Brucella spp.)是一种无运动性、无荚膜、兼性厌氧的革兰氏阴性杆 菌,且具有较强的致病性和宿主特异性。众所周知,布病已经对畜牧业造成了极大的经济损 失并且严重影响其发展,甚至威胁到人类的健康安全。因此,建立一种快速、简单、灵敏的方 法检验布鲁氏菌显得尤为重要。 近年来,消费者们越来越关注食品安全问题,同时食品行业和政府部门也表达了 快速简便检验布鲁氏菌的迫切需求。目前,用于检测布鲁氏菌的方法主要包括病原学检测、 血清学检测及分子生物学检测方法。其中最常用的检测方法是病原学检测,即分离培养出 目标菌株,被称作是检测布病的“黄金标准”。但该方法对实验室的要求较高、检测周期较 长、灵敏度较低且常用于发病期检测。血清学检测包括试管凝集试验、补体结合试验、虎红 平板凝集试验等方法,但这些方法不能准确区分人为接种和自然感染。分子生物学检测包 括聚合酶链式反应(PCR)、实时定量PCR(RT-PCR)等方法,具有灵敏度高、特异性强等优点, 但这些大多需要昂贵的专业仪器设备,不适合现场检验。 与传统的检测方法比较,环介导等温技术具有高特异性、高灵敏度、快速简便等优 点,适合基层与现场检验。基于以上优点,LAMP已经被广泛应用于病原微生物的快速检测方 面,如金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、肠球菌耶尔森氏菌、志贺氏菌等。 虽然公开号CN103205493A的中国专利,公开了一种检测布鲁氏菌的LAMP方法,该 方法也是利用环介导等温技术进行布鲁氏菌检测的方法,但采用该方法检测布鲁氏菌时, 需要的设备复杂,对操作要求高,不能准确的适应现场的快速检测,并且该方法中采用的引 物特异性和灵敏度不能满足精准和快速测试的要求。
技术实现要素:
本发明的目的在于提供一种布鲁氏菌环介导等温扩增技术检测方法,以解决上述