技术摘要：
木犀草素作为抑制赭曲霉毒素A肾毒性的食物营养素的应用。LUT通过恢复细胞活力和阻止LDH释放而发挥其预防作用。它通过减少ROS积累，改善线粒体膜电位降低，使抗氧化酶活性恢复到对照水平，从而减轻OTA诱导的氧化应激和脂质过氧化。通过细胞免疫荧光实验、报告基因质粒转 全部
背景技术：
赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)这一真菌毒素污染物，具有严重的肾毒性，是国 际社会普遍关注的食品安全问题。木犀草素(luteolin,LUT)作为一种广泛存在于天然植物 或食品中的营养素，因其显著的抗氧化能力，越来越受到科学家的关注。
技术实现要素：
发明人经过大量实验研究发现食物营养素LUT通过中和ROS累积发挥抑制OTA所致 肾细胞毒性的作用。LUT激活Nrf2通路增加了细胞抗氧化损伤的能力；同时LUT还通过调控 HIF-1α通路从而启动损伤后的修复过程。OTA诱导ROS累积在0-24h内呈现先上升后下降再 上升的过程，且在1h和24h存在2个峰值。表明LUT可开发为抑制OTA肾毒性的食物营养素。 与现有技术相比，本发明的有益效果：LUT作为黄酮类膳食补充剂在抑制OTA以及 其它真菌毒素方面具有较好的应用潜力，可开发为作为抑制OTA肾毒性的食物营养素，从而 拓展LUT的用途。 附图说明 图1木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致肾细胞毒性的抑制作用实验； 图2木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致细胞膜的完整性(A-F)和细胞上清乳 酸脱氢酶(LDH)渗漏(G)的影响实验； 图3赭曲霉毒素A(OTA)所致ROS累积的时间关系图，OTA浓度为50μM，作用时间为 (A)0h，(B)1h，(C)3h，(D)6h，(E)12h，(F)24h； 图4木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致ROS累积的抑制作用实验，(a)0.1％ DMSO，(b)50μM OTA，(c)50μM OTA 100μM LUT，(d)100μM LUT。作用时间分别为(A)1h和(B) 24h； 图5木犀草素(LUT)抑制赭曲霉毒素A(OTA)所致的线粒体膜电位下降，(A)0.1％ DMSO组，(B)50μM OTA组，(C)50μM OTA 100μM LUT组，(D)100μM LUT组，作用时间为24h；左 列代表线粒体膜电位较高，JC-1形成聚合物，呈红色荧光；中间列代表线粒体膜电位较低， JC-1为单体，呈绿色荧光；右列为左中列重叠后得到； 图6木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致(A-D)Nrf2核转位和(E)ARE抑制的保 护作用实验，实验分为4组，(A)为0.1％DMSO组，(B)50μM OTA组，(C)50μM OTA 100μM LUT 组，(D)100μM LUT组，作用时间为24h。细胞用Nrf2一抗孵育后用荧光二抗孵育，细胞核用 DAPI染色，然后置于荧光显微镜下观察拍照。(E)采用lipofectamine 8000转染p-ARE质粒 24h后进行药物孵育，24h后依据荧光素酶报告基因检测试剂盒进行检测，ARE激活用RLU表 3 CN 111567725 A 说 明 书 2/6 页 示； 图7木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致(A-D)HIF-1α核转位激活的调控作用 实验，实验分为4组，(A)为0.1％DMSO组，(B)50μM OTA组，(C)50μM OTA 100μM LUT组，(D) 100μM LUT组，作用时间为24h。细胞用HIF-1α一抗孵育后用荧光二抗孵育，细胞核用DAPI染 色，然后置于荧光显微镜下观察拍照； 图8赭曲酶毒素A(OTA)对(A)Nrf2通路相关基因，包括Nrf2,HO-1,γ-GCS,TGF-β在 mRNA水平表达量的影响和(B)HIF-1α通路相关基因，包括HIF-1α,VEGF,EPO,TGF-β在mRNA水 平表达量的影响。作用时间分别为0，3，6，12，24h； 图9木犀草素(LUT)调控(A,C)Nrf-2和(B,D)HIF-1α通路相关基因的表达抑制赭曲 酶毒素A(OTA)所致的肾细胞氧化性损伤实验，实验分为4组，0.1％DMSO，50μM OTA，50μM OTA 100μM LUT，100μM LUT组，作用时间为(A,B)3h，(C,D)24h。
木犀草素作为抑制赭曲霉毒素A肾毒性的食物营养素的应用。LUT通过恢复细胞活力和阻止LDH释放而发挥其预防作用。它通过减少ROS积累，改善线粒体膜电位降低，使抗氧化酶活性恢复到对照水平，从而减轻OTA诱导的氧化应激和脂质过氧化。通过细胞免疫荧光实验、报告基因质粒转 全部
背景技术：
赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)这一真菌毒素污染物，具有严重的肾毒性，是国 际社会普遍关注的食品安全问题。木犀草素(luteolin,LUT)作为一种广泛存在于天然植物 或食品中的营养素，因其显著的抗氧化能力，越来越受到科学家的关注。
技术实现要素：
发明人经过大量实验研究发现食物营养素LUT通过中和ROS累积发挥抑制OTA所致 肾细胞毒性的作用。LUT激活Nrf2通路增加了细胞抗氧化损伤的能力；同时LUT还通过调控 HIF-1α通路从而启动损伤后的修复过程。OTA诱导ROS累积在0-24h内呈现先上升后下降再 上升的过程，且在1h和24h存在2个峰值。表明LUT可开发为抑制OTA肾毒性的食物营养素。 与现有技术相比，本发明的有益效果：LUT作为黄酮类膳食补充剂在抑制OTA以及 其它真菌毒素方面具有较好的应用潜力，可开发为作为抑制OTA肾毒性的食物营养素，从而 拓展LUT的用途。 附图说明 图1木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致肾细胞毒性的抑制作用实验； 图2木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致细胞膜的完整性(A-F)和细胞上清乳 酸脱氢酶(LDH)渗漏(G)的影响实验； 图3赭曲霉毒素A(OTA)所致ROS累积的时间关系图，OTA浓度为50μM，作用时间为 (A)0h，(B)1h，(C)3h，(D)6h，(E)12h，(F)24h； 图4木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致ROS累积的抑制作用实验，(a)0.1％ DMSO，(b)50μM OTA，(c)50μM OTA 100μM LUT，(d)100μM LUT。作用时间分别为(A)1h和(B) 24h； 图5木犀草素(LUT)抑制赭曲霉毒素A(OTA)所致的线粒体膜电位下降，(A)0.1％ DMSO组，(B)50μM OTA组，(C)50μM OTA 100μM LUT组，(D)100μM LUT组，作用时间为24h；左 列代表线粒体膜电位较高，JC-1形成聚合物，呈红色荧光；中间列代表线粒体膜电位较低， JC-1为单体，呈绿色荧光；右列为左中列重叠后得到； 图6木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致(A-D)Nrf2核转位和(E)ARE抑制的保 护作用实验，实验分为4组，(A)为0.1％DMSO组，(B)50μM OTA组，(C)50μM OTA 100μM LUT 组，(D)100μM LUT组，作用时间为24h。细胞用Nrf2一抗孵育后用荧光二抗孵育，细胞核用 DAPI染色，然后置于荧光显微镜下观察拍照。(E)采用lipofectamine 8000转染p-ARE质粒 24h后进行药物孵育，24h后依据荧光素酶报告基因检测试剂盒进行检测，ARE激活用RLU表 3 CN 111567725 A 说 明 书 2/6 页 示； 图7木犀草素(LUT)对赭曲霉毒素A(OTA)所致(A-D)HIF-1α核转位激活的调控作用 实验，实验分为4组，(A)为0.1％DMSO组，(B)50μM OTA组，(C)50μM OTA 100μM LUT组，(D) 100μM LUT组，作用时间为24h。细胞用HIF-1α一抗孵育后用荧光二抗孵育，细胞核用DAPI染 色，然后置于荧光显微镜下观察拍照； 图8赭曲酶毒素A(OTA)对(A)Nrf2通路相关基因，包括Nrf2,HO-1,γ-GCS,TGF-β在 mRNA水平表达量的影响和(B)HIF-1α通路相关基因，包括HIF-1α,VEGF,EPO,TGF-β在mRNA水 平表达量的影响。作用时间分别为0，3，6，12，24h； 图9木犀草素(LUT)调控(A,C)Nrf-2和(B,D)HIF-1α通路相关基因的表达抑制赭曲 酶毒素A(OTA)所致的肾细胞氧化性损伤实验，实验分为4组，0.1％DMSO，50μM OTA，50μM OTA 100μM LUT，100μM LUT组，作用时间为(A,B)3h，(C,D)24h。
