技术摘要：
本发明公开了一种松墨天牛热激蛋白MaltHSP20‑11及其编码基因和应用，属于热激蛋白领域。本发明提供的松墨天牛热激蛋白HSP20基因全长531bp，编码176个氨基酸。通过荧光定量方法，获得了该基因在热胁迫条件下的表达特性，高温会明显诱导该基因的上调，表明此蛋白在松墨  全部
背景技术：
松墨天牛(Monochamus  alternatus)隶属于鞘翅目(Coleoptera)，天牛科 (Cerambycidae)，不仅是我国南方松林中的重要蛀干害虫，还是世界检疫性有害生物松材 线虫的主要传播媒介。松墨天牛与松材线虫的侵染循环破坏松树输导组织，导致松树萎蔫 病，对我国乃至世界的森林资源造成巨大威胁。松墨天牛主要广布于我国的亚热带及热带 地区，由于全球气候变暖，极端高温频现，该害虫在夏季有时要经历高达将近40℃的高温， 具有较强的耐热性。 在长期的进化过程中，面对外界环境的高温压力，昆虫逐渐形成了一套由躲避，感 觉神经元检测，体温调节，热代谢回应，激素分泌及胁迫响应等构成的复杂精密的适应机 制。而热激蛋白(Heat  Shock  Protein，HSP)，又称作热休克蛋白，是生物体胁迫响应的重要 组分。除了高温胁迫之外，低温、干旱、缺氧、高盐、杀虫剂等生物或非生物胁迫均会诱导热 激蛋白的上调。这类蛋白作为分子伴侣，可调控蛋白质的合成、聚集及降解。在高温胁迫下， 能量供应受限，蛋白质的合成受阻，热激蛋白会被优先转录，引导其他蛋白质的正确折叠， 帮助生物体度过不良环境。根据分子量的大小，热激蛋白被划分为HSP90，HSP70，HSP60， HSP40，和HSP20等5个家族。 热激蛋白20属于ATP-独立型热激蛋白，即可在ATP不存在的条件下独立工作。由于 面临热胁迫时昆虫的ATP合成减弱，因此，在热胁迫下HSP20作为昆虫抵御胁迫的生理机制 中第一道防线，HSP20以寡二聚体的形式形成疏水结合腔与底物蛋白进行结合，防止在热胁 迫条件下未折叠蛋白质的错误折叠，以及已折叠蛋白质的受热变性。因此，HSP20家族在昆 虫抵御高温胁迫过程中尤为重要。 目前，对昆虫热激蛋白的研究主要集中于HSP70及HSP90家族，而对于应对热胁迫 的首要防线HSP20研究较少。
技术实现要素：
针对现有技术存在的上述问题，本发明所要解决的技术问题在于提供一种松墨天 牛热激蛋白MaltHSP20-11。本发明所要解决的另一技术问题在于提供松墨天牛热激蛋白 MaltHSP20-11的编码基因。本发明还要解决的技术问题在于提供一种松墨天牛热激蛋白 MaltHSP20-11的应用，可有效保护猪心苹果酸脱氢酶的热聚沉。 为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案如下： 一种松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11，其氨基酸序列如SEQ  ID  NO.1所示。 所述的松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11的编码基因，其核苷酸序列如SEQ  ID  NO.2所示。 3 CN 111574609 A 说　明　书 2/7 页 扩增所述的松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11的编码基因的引物。 含有所述的松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11的编码基因的载体。 作为优选，所述的含有松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11的编码基因的载体为PET- 28( )/MaltHSP20-11。 含有所述载体的细胞、组织或微生物。 所述的松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11在保护蛋白防止热聚沉中的应用。 所述的应用具体方法为：将所述的蛋白与所述的松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11 在缓冲液中混溶。 所述的应用中，所述的蛋白为苹果酸脱氢酶。 相比于现有技术，本发明的有益效果为： 本发明提供了一种松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11及其编码基因和应用。所提供 的松墨天牛热激蛋白HSP20的cDNA序列全长531bp，编码176个氨基酸。通过荧光定量方法， 获得了该基因在热胁迫条件下的表达特性，结果显示，高温会明显诱导该基因的上调，在虫 体45℃处理3h时相对表达量达到峰值，表明此蛋白在松墨天牛幼虫抵御高温胁迫中发挥了 重要作用。最后构建原核表达载体，通过体外表达的方法，成功获得了纯化的松墨天牛热激 蛋白MaltHSP20-11。对Ni 树脂柱纯化后的松墨天牛热激蛋白MaltHSP20进行分子伴侣活性 验证，表明该蛋白可有效保护苹果酸脱氢酶防止热聚沉。因此，本申请提供的松墨天牛热激 蛋白MaltHSP20-11及其编码基因，具有极高的应用价值，也为松墨天牛耐热性研究提供了 分子依据。 附图说明 图1为松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11基因在高温胁迫下的表达模式分析结果 图；注：大写字母表示同一处理温度不同处理时间之间的差异性，小写字母表示同一处理时 间不同处理温度之间的差异性； 图2为原核表达产物的检测结果图； 图3为过镍柱纯化的松墨天牛热激蛋白MaltHSP20-11电泳结果图； 图4为MaltHSP20-11蛋白保护苹果酸脱氢酶(MDH)防止热聚沉试验结果图。