技术摘要：
本发明属于医疗检测设备领域，提供了一种同步检测流感病毒A型、B型和肺炎衣原体、肺炎支原体的IgM抗体的联合装置，它包括双通道卡壳、并列设置于双通道卡壳中的试纸条FluA&B和试纸条CP&MP；试纸条FluA&B的硝酸纤维素膜上间隔设置的流感病毒A检测线上包被有高特异性流感  全部
背景技术：
流感病毒A型/B型是流感的主要病原体，在具有潜在病理学的患者中会产生严重 的并发症。其中，流感病毒A型抗原易发生变异，多次引起世界性大流行；流感病毒B型对人 类致病性较低，流行规模比A型小得多。流感病毒属粘病毒，具有多形态，一般为球形，也有 的呈丝状或杆状，病毒直径为80～120nm。流感病毒的结构主要包括内部的核心、衣壳和外 面的包膜。 流感病毒的传染源主要是患者，其次为隐性感染者，被感染的动物也可能是一种 传染源。主要传播途径是带有流感病毒的飞沫，经呼吸道进入体内。少数也可经共用手帕、 毛巾等间接接触而感染。 肺炎衣原体(CP)为新发现的一种衣原体，主要引起呼吸道和肺部感染。肺炎衣原 体常在儿童和成人中产生上呼吸道和呼吸道感染。现仅知人是该衣原体宿主，感染方式可 能为人与人之间通过呼吸道分泌物传播。人类的肺炎衣原体感染是世界普遍性的。肺炎衣 原体传染途径是通过呼吸道分泌物的人-人传播。因此，在半封闭的环境如家庭、学校、军队 以及其他人口集中的工作区域可存在小范围的流行。肺炎衣原体的感染还可能与哮喘、冠 心病及动脉粥样硬化的发病、慢性阻塞性肺疾病的急性发作和恶化有关。目前，肺炎衣原体 已是继肺炎双球菌和流感嗜血杆菌之后引起社区获得性肺炎的主要病原体，与嗜肺军团菌 和肺炎支原体一起成为社区获得性肺炎的三种非典型病原体，占社区获得性肺炎的10％～ 20％。5岁以下儿童极少受染，8岁以上儿童及青年易被感染。 支原体肺炎(MP)是肺炎支原体引起的急性呼吸道感染伴肺炎，肺炎支原体病原体 直径为125～150nm介于细菌与病毒之间,它由口、鼻分泌物经空气传播，引起呼吸道感染， 秋冬季较多。MP是儿童时期肺炎和其他呼吸道感染的重要病原之一。肺炎支原体可引起扁 桃体炎、鼻炎、中耳炎、气管炎、毛细支气管炎、肺炎，幼儿多患上呼吸道感染，学龄儿多患肺 炎。 目前临床上常见的流感病毒A型/B型快速检测以抗原检测为主，采集鼻咽拭子作 为检测标本，而常见的肺炎衣原体(CP)和肺炎支原体快速检测方法以抗体检测为主，要采 集血样作为检测标本，并开发了相对成熟的检测装置，比如检测试纸、检测试剂盒等，但是 这些检测装置均是单一检测一种病毒或细菌的抗原，比如CN105823875A，公开了一种肺炎 支原体抗体免疫胶体金检测试纸条及其制备方法；或者同时检测两种同类型细菌或同类型 病毒，比如CN109142725A公开了一种甲型通用及H7N9亚型流感病毒胶体金联合检测试纸的 制备方法。 由于流感病毒、衣原体、支原体感染易与其它呼吸道疾病混淆，所以现有检测装置 5 CN 111610329 A 说　明　书 2/8 页 与临床诊断之间的主要问题体现在如下方面： 1、检测样品要求不统一，需要多次化验、诊断：目前的临床处理方式是，在根据临 床症状需要同时进行流感病毒A型/B型和肺炎衣原体(CP)和肺炎支原体的快速鉴别诊断 时，就需要多次开具化验单、多次采集不同的检测标本，采用同一厂家或不同厂家的多项检 测试剂，进行多步复杂的操作才能实现。 2、因为多次化验和/诊断之间的不连续和不全面，导致用药错误或拖延病情：在单 一检测流感病毒A型/B型和肺炎衣原体(CP)/肺炎支原体检测并根据结果进行临床判断时， 会导致存在对病情不能全面分析和料了解的现实发生，且可能因为病人惰于反复多次进行 检测，影响及时治疗。 因此，通过同一次取样能同时检测并判断或排除是否为流感病毒A型/B型和肺炎 衣原体(CP)/肺炎支原体急性感染的装置和方法在临床实践中具有重大创新意义。 另外，病原体感染后IgM和IgG抗体出现的趋势图如图1所示，可以看出，一般呼吸 道病原体感染的潜伏期为1～7天，感染7-10天后，血清特异性抗体逐渐产生，首先出现的是 免疫球蛋白IgM抗体，IgM是初次体液免疫应答中最早出现的抗体，是机体抗感染的先头部 队，然后才出现IgG抗体，而且IgM出现早，消失的快，与病程发展密切相关，IgG出现的晚，消 失的慢，滞后于病程发展阶段。因此，出现IgM抗体提示新近发生感染，出现IgG抗体提示既 往感染。 因此，通过同时检测血液标本中的四种呼吸道病原体的IgM，并将其用于呼吸道病 原体感染的早期诊断，相较于其他指标更具灵敏性和准确性。
技术实现要素：
本发明的目的是针对现有技术的缺陷和临床亟需，提出一种同步检测流感病毒A 型、B型和肺炎衣原体、支原体的IgM抗体的联合装置及其检测方法，本发明装置通过单卡片 双试纸条设计，实现经同一血液标本采样在本发明装置上同时检测流感病毒A型/B型和肺 炎衣原体(CP)和肺炎支原体(MP)四种病原体，从而实现一次开单、一次采样、同时检测四种 病原体，能极大的简化临床检测流程，为患者的快速确诊，合理用药提供最大便利，具有重 要的临床使用价值。 本发明的技术方案是，一种同步检测流感病毒A型、B型和肺炎衣原体、肺炎支原体 的IgM抗体的联合装置，它包括双通道的卡壳；并列设置于双通道卡壳中的试纸条FluA&B和 试纸条CP&MP；设置于卡壳上分别与所述试纸条FluA&B和试纸条CP&MP各自独立连通的第一 加样孔和第二加样孔；所述试纸条FluA&B包括抗红细胞抗体预处理的第一样品垫、第一滤 血垫、FluA&B示踪物喷涂玻璃纤维垫、FluA&B抗原包被的硝酸纤维素膜、第一吸水纸和第一 塑料底板；所述第一塑料底板上依次粘贴第一样品垫、第一滤血垫、FluA&B示踪物喷涂玻璃 纤维垫、FluA&B抗原包被的硝酸纤维素膜、第一吸水纸；所述FluA&B抗原包被的硝酸纤维素 膜上从FluA&B示踪物喷涂玻璃纤维垫端向第一吸水纸端依次间隔设置有流感病毒A检测 线、流感病毒B检测线和第一质控线，所述流感病毒A检测线上包被有高特异性流感病毒A抗 原，所述流感病毒B检测线上包被有高特异性流感病毒B抗原，所述第一质控线上包被有质 控线包被受体；所述第一加样孔与所述抗红细胞抗体预处理的第一样品垫在双通道卡壳上 的位置对应；所述试纸条CP&MP包括抗红细胞抗体预处理的第二样品垫、第二滤血垫、CP&MP 6 CN 111610329 A 说　明　书 3/8 页 示踪物喷涂玻璃纤维垫、CP&MP抗原包被的硝酸纤维素膜、第二吸水纸和第二塑料底板，所 述第二塑料底板上依次粘贴抗红细胞抗体预处理的第二样品垫、第二滤血垫、CP&MP示踪物 喷涂玻璃纤维垫、CP&MP抗原包被的硝酸纤维素膜、第二吸水纸；所述CP&MP抗原包被的硝酸 纤维素膜上从CP&MP示踪物喷涂玻璃纤维垫端向第二吸水纸端依次间隔设置有肺炎衣原体 检测线、肺炎支原体检测线和第二质控线，所述肺炎衣原体检测线上包被有高特异性肺炎 衣原体抗原，所述肺炎支原体检测线上包被有高特异性肺炎支原体抗原，所述第二质控线 上预先包被有质控线包被受体；所述第二加样孔与所述第二红细胞抗体预处理的样品垫在 双通道卡壳上的位置对应。 进一步的，上述FluA&B抗原包被的硝酸纤维素膜的两端分别与第一吸水纸、FluA& B示踪物喷涂玻璃纤维交错搭接，所述FluA&B示踪物喷涂玻璃纤维的另一端与第一滤血垫 交错搭接，所述第一滤血垫的另一端与第一样品垫交错搭接；所述CP&MP抗原包被的硝酸纤 维素膜的两端分别与第二吸水纸、CP&MP示踪物喷涂玻璃纤维交错搭接，所述CP&MP示踪物 喷涂玻璃纤维的另一端与第二滤血垫交错搭接，所述第二滤血垫的另一端与第二样品垫交 错搭接。 进一步的，上述FluA&B示踪物喷涂玻璃纤维垫和CP&MP示踪物喷涂玻璃纤维均是 用示踪物缓冲液稀释标记好的示踪物获得示踪物溶液，然后用示踪物溶液喷涂玻璃纤维制 得；其中所述标记好的示踪物通过示踪物标记抗人IgMμ链抗体和质控线标记配体获得。 更进一步的，上述示踪物标记抗人IgMμ链抗体和质控线标记配体中的示踪物为胶 体金、胶体硒、彩色乳胶微球、荧光染料、荧光微球、量子点和炭黑粒子中的一种或多种的组 合；示踪物颗粒粒径为30～300nm。 更进一步的，上述抗人IgMμ链抗体为多抗或单抗；当抗人IgMμ链抗体为多抗时，它 包括羊抗人IgMμ链，兔抗人IgMμ链、驴抗人IgMμ链。 更进一步的，上述示踪物缓冲液由Tris-HCL液、蔗糖、海藻糖、牛血清白蛋白BSA组 成，pH值8.5，其中Tris-Hcl浓度为0.02-0.1mol/L，蔗糖浓度为按质量百分比计5～20％，海 藻糖浓度为按质量百分比计1～5％，牛血清白蛋白BSA浓度为按质量百分比计0.5～2％。 进一步的，上述抗红细胞抗体预处理的第一样品垫和抗红细胞抗体预处理的第二 样品垫均使用预处理液依次进行浸泡、烘干处理得到，其中所述处理液由Tris-HCL液、抗红 细胞抗体、牛血清白蛋白BSA、酪蛋白、表面活性剂TritonX-100组成，其中Tris-HCL液浓度 为0.1mol/L，抗红细胞抗体的稀释度为1/200-1/2000，牛血清白蛋白BSA浓度为按质量百分 比计0.5～1％，酪蛋白浓度为按质量百分比计0.1～0.2％、表面活性剂TritonX-100浓度为 按质量百分比计0.5～1％。 还进一步的，上述所述第一质控线和第二质控线上均包被有包被受体，所述第一 质控线上包被的受体与FluA&B示踪物喷涂玻璃纤维垫中的示踪物标记质控线标记配体配 对；所述第二质控线上包被的受体与CP&MP示踪物喷涂玻璃纤维垫中的示踪物标记质控线 标记配体配对；所述受体-配体配对包括兔/羊抗鼠IgG-鼠IgG、兔抗鼠IgG-鼠IgG、羊抗鸡 IgY-鸡IgY、链亲和素-生物素偶联BSA、ProteinA-鼠IgG。 进一步的，上述第一加样孔和第二样孔用于分别向试纸条FluA&B和试纸条CP&MP 添加检测标本，且所述第一加样孔和第二样孔中被添加的检测标本为同种标本；所述检测 标本为全血、血清或血浆，所述全血为指尖血或静脉血；所述第一加样孔和第二样孔中每个 7 CN 111610329 A 说　明　书 4/8 页 加样孔需要的检测标本的体积为5-30ul。 本发明同时提供了利用上述同步检测流感病毒A型、B型和肺炎衣原体、肺炎支原 体的IgM抗体的联合装置进行流感病毒A型、B型和肺炎衣原体、肺炎支原体的IgM抗体联合 检测的方法，包括以下步骤： 第一步、按照临床样本采集规范获取检测标本； 第二步、同时联合使用配套的样本稀释液，即，向第一加样孔和第二样孔S2添加检 测标本的同时，向每个加样孔添加样本稀释液，所述样本稀释液使用量为70-95ul/加样孔； 第三步、加样完成后，开始计时10-15分钟； 第四步、计时结束，马上观察试纸条FluA&B上的流感病毒A检测线、流感病毒B检测 线和第一质控线的显线情况；和试纸条CP&MP上肺炎衣原体检测线、肺炎支原体检测线和第 二质控线的显线情况，获得流感病毒A型、B型和肺炎衣原体、支原体感染结果。 其中第二步中的样本稀释液由Tris-HCL液、酪蛋白、HAMA抗体抑制剂、表面活性剂 Tween-20组成，其中Tris-HCL液浓度为0.1mol/L，HAMA抗体抑制剂的稀释度为1/1000-1/ 10000，酪蛋白浓度为按质量百分比计0.2～2.0％、表面活性剂Tween-20浓度为按质量百分 比计0.5～1％。 本发明相比于现有技术的先进性在于： 1、本发明针对临床病毒检测和肺炎衣原体支原体检测的局限和痛点，设计了一卡 两联四指标联合检测装置，该联合检测装置包括流感病毒A型/B型检测的试纸条FluA&B，和 肺炎衣原体(CP)/支原体(MP)检测的试纸条CP&MP，两个试纸条分别各自设置于联合装置的 双通道卡壳的双通道中、在一个卡壳中相互隔离，在实现四指标同步独立检测的同时，两个 试纸条的样本、检测过程、检测结果相互独立、互不影响，最终实现了流感病毒A型/B型和肺 炎衣原体/支原体的检测统一在一个卡片上简单、快速、同步进行。 2、本发明联合装置中硝酸纤维素膜上检测线上包被抗原，质控线上包被抗体，实 现IgM抗体检测：第一抗原包被的硝酸纤维素膜上间隔设置有流感病毒A检测线、流感病毒B 检测线和第一质控线，所述流感病毒A检测线上包被有高特异性流感病毒A抗原，所述流感 病毒B检测线上包被有高特异性流感病毒B抗原，所述第一质控线上包被有质控线包被受 体；所述第二抗原包被的硝酸纤维素膜上间隔设置有肺炎衣原体检测线、肺炎支原体检测 线和第二质控线，所述肺炎衣原体检测线上包被有高特异性肺炎衣原体抗原，所述肺炎支 原体检测线上包被有高特异性肺炎支原体抗原，所述第二质控线上固相质控线包被受体。 区别于现有技术的抗原检测及其他检测指标，更具临床判断准确性。 3、基于本发明的联合检测装置，本发明提供的检测方法通过单次同样本采取、同 步化验可同步获得流感病毒A型/B型和肺炎衣原体(CP)/支原体的检测结果，即只采用一项 血液标本检测四种病原体，相比于现有技术需要采取鼻咽拭子作为样本检测以获得流感病 毒A型/B型，采取血液作为样本检测仪获得肺炎衣原体(CP)/支原体的检测结果，本发明实 现了一次开单、一次采样、同时检测四种病原体，节约了检测成本、患者财力和时间，提高了 诊断效率，极大地简化临床检测流程，为患者的快速确诊，合理用药提供最大便利，具有重 要的临床使用价值。 4、本发明装置既能检测血清，血浆，又能检测全血，既能检测静脉血，优选能检测 指尖血，且检测所需的血样用量少，这对于临床应用提供极大便利，原因有二：其一、众所周 8 CN 111610329 A 说　明　书 5/8 页 知，老年人和儿童是呼吸道疾病的易感高发人群，但老年人由于血管老化，儿童尤其是幼儿 由于血管极细，采集这两个人群的静脉血在临床实践中都是一件很困难很棘手的事情，因 此能检测指尖血，对这两类人群的采样简化具有很大意义；其二、呼吸道疾病尤其是本发明 检测装置所针对的这四种病原体引起的呼吸道疾病，流行期发病集中，且症状往往较重，患 者就医时感觉异常痛苦，且易交叉感染，传统的血清、血浆检测因为需要对采集后的血样进 行离心处理，无形中增加了检测时间，进而增加了患者等待的时间，增加痛苦的同时等待的 过程也增加了交叉感染的风险，而指尖血检测，简便快速，无需多余样本处理，一扎一滴， 10-15分钟之内结果就出来了，这无疑具有极大的临床应用价值。 附图说明 从下面结合附图对本发明实施例的详细描述中，本发明的这些和/或其它方面和 优点将变得更加清楚并更容易理解，其中： 图1为本发明