技术摘要：
本发明涉及经PEG修饰的抗HIV多肽。具体而言，在C34多肽的N端、C端或第10位添加半胱氨酸，并通过Michael加成反应将具有马来酰胺修饰的聚乙二醇基团偶联至所述半胱氨酸，对C34多肽进行PEG化修饰，其中，PEG部分的分子量为10000以上，优选为10000‑100000，更优选为10000  全部
背景技术：
艾滋病是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染引起的具有极高致死率的疾病，HIV会导 致全身免疫系统的严重损害，给人类生命健康安全造成极大威胁。自1981年首次被发现以 来，其防治一直没能获得有效的解决。目前在全球范围内艾滋病已经呈现出了爆发性流行 的趋势，全世界HIV携带者已达到3400万人左右。据我国卫生部统计估算，截至2011年底，中 国存活艾滋病病毒携带者和艾滋病病人(PLHIV)已达到78万人(62～94万人)。由于该病毒 的高突变率，目前尚未寻找到有效的治愈艾滋病的方法。 目前上市的HIV的治疗性药物多为针对病毒逆转录酶、整合酶、蛋白酶等的一些小 分子酶抑制剂。由于HIV的超高突变性，使得这些小分子特效药物正在逐渐退化为常效、甚 至无效药物。近年来，随着HIV入侵宿主细胞分子机制的逐步阐明，抑制该过程的多肽药物 逐渐成为艾滋病防治领域的研究热点。这类多肽药物例如第一代侵入抑制剂C34和T20，其 作用机理在于可特异性结合HIV囊膜上的融合蛋白，从而抑制病毒进入宿主细胞。 C34分子被用作第一代融合抑制剂，其存在水溶性差和半衰期短等问题，许多学者 曾对C34分子进行多种基团修饰来改善这些问题，但关于大分子修饰的研究较少。 本课题组在专利申请201810547641.7公开了经修饰的C34肽，其中，经PEG化修饰 的C34肽的水溶性由≤1mg/mL提高至3mg/mL以上，从而延长了C34分子在大鼠体内的血浆半 衰期。该研究主要集中在PEG分子量为700-5000的修饰。 本发明人经过进一步的研究发现，以更大分子量的PEG对C34肽进行PEG修饰，可使 其水溶性获得很大程度的改善，在SD大鼠体内的血浆半衰期得到明显延长，且对急性感染 SHIV病毒的恒河猴有显著的保护效果。
技术实现要素：
在第一方面，本发明提供了一种经修饰的C34肽，所述经修饰的C34肽具有式I的结 构： Ac-BpWMEWDREINNcBdYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLBq-NH2式I； 其中，c为0或1；d为0或1；p为0或1；q为0或1；c和d不同时为0；p、q和d不同时为0；Ac 表示式I肽链的N端带有乙酰化修饰；NH2表示式I肽链的C端带有酰胺化修饰；B为式II的基 团 式II中，Z为半胱氨酸，所述半胱氨酸通过酰胺键与式I肽链中的氨基酸相连；Y为 6 CN 111574597 A 说　明　书 2/17 页 式III的基团： mPEG   式III； 式III中，m为甲氧基， 其中，所述PEG的分子量为10000以上。 在优选地实施方式中，所述PEG的分子量为约10000-100000，优选为10000-50000。 在第二方面，本发明提供了制备如第一方面所述的经PEG修饰的C34肽的方法，所 述方法包括： (1)提供式V以及式VI的化合物 Ac-ZpWMEWDREINNcZdYTSLIHSLIEESQNQQEKNEQELLZq-NH2   式VI； 式VI中，Z为半胱氨酸，所述半胱氨酸通过酰胺键与式VI肽链中的氨基酸相连；c为 0或1；d为0或1；p为0或1；q为0或1；c和d不同时为0；p、q和d不同时为0；Ac表示式VI肽链的N 端带有乙酰化修饰；NH2表示式VI肽链的C端带有酰胺化修饰； 式V中，Y为式III的基团： mPEG   式III； 式III中，m为甲氧基，其中，所述PEG的分子量为10000以上； (2)使得式VI化合物中Z的巯基与式V中的马来酰胺发生加成反应，获得所述经PEG 修饰的C34肽。 在第三方面，本发明提供了第一方面所述的经PEG修饰的C34肽在制备抗HIV病毒 的药物中的应用。 在第四方面，本发明提供了第一方面所述的经PEG修饰的C34肽在制备抗HIV病毒 的药物组合物中的应用。 有益效果 本发明人发现相比现有技术中报道的PEG修饰的C34肽，采用分子量更大的PEG(例 如，分子量在10000以上的PEG)修饰的C34肽具有明显增加的水溶性和大鼠血浆半衰期，更 易进入淋巴结且对急性感染SHIVSF162P3的恒河猴具有较强的抗HIV病毒活性。尤其是PEG40k 修饰的C34肽，相比具有更小分子量的PEG(PEG2000、PEG5000等)修饰的C34肽，其水溶性以 及体内半衰期得到明显改善，这使得其更易于成药，并且使得C34肽的体内长效稳定性得到 显著提升。 附图说明 图1为根据实施例1制备的PEG10kNC的MALDI-TOF质谱图。 图2为根据实施例2制备的PEG20kNC的MALDI-TOF质谱图。 图3为根据实施例3制备的PEG40kNC的MALDI-TOF质谱图。 图4为示出了使用给药后各个时间点采集的大鼠血清抑制50％病毒所需的稀释度 的图。 图5为示出了给药后各个时间点采集的大鼠血清中C34NC或PEG40KNC的浓度的图。 7 CN 111574597 A 说　明　书 3/17 页 图6为示出了病毒感染后不同时间点PEG40KNC实验组和生理盐水对照组的血浆 SHIV  RNA载量的图。