技术摘要：
本发明公开了一种金钟藤无性扩繁的方法，包括以下步骤：(1)种子预处理；(2)种子培养；(3)无菌苗扩繁；(4)新植株扩繁。本发明解决了传统扦插体系成活率低、种子实生苗发芽率低且后代产生性状分离的问题，本发明可以使任意一个具有优良性状的金钟藤基因型个体大量快速无  全部
背景技术：
金钟藤，又名多花山猪菜，旋花科茉栾藤属多年生木质藤本植物，其叶可作为猪或 其它家畜的食物，有作为饲料的利用价值。金钟藤生长在次生林林缘，且近些年来随温度升 高生长范围逐渐增大有灾变化的趋势。已有研究为探明金钟藤的快速生长的机制有了长足 的进展，金钟藤的光合作用速率对光、热的正向响应敏感且强烈，随着一定范围内光强的增 加或温度的上升金钟藤的光合速率与生长速率明显增加，且金钟藤的种子对光、温度也有 相同的响应，发芽率会显著增高。但是金钟藤的种子近乎100％都具有硬实现象，种皮不容 易透水，不能快速吸涨，种子发芽率较低，现有技术中金钟藤的扦插体系成活率低于10％。 在分子研究层面，植株的无性系是做实验的最佳材料，但目前对金钟藤无性系培 育的研究近乎空白。
技术实现要素：
本发明的目的是提供了一种金钟藤无性扩繁的方法，解决了传统扦插体系成活率 低、种子实生苗发芽率低且后代产生性状分离的问题，本发明可以使任意一个具有优良性 状的金钟藤基因型个体大量快速无性繁殖，使该基因型个体在一定时间后产生大量同基因 型植株。 为了实现上述目的，本发明的技术方案为：提供一种金钟藤无性扩繁的方法，包括 以下步骤： (1)种子预处理：在无菌条件下，将金钟藤种子的尖端开边长1～2毫米的小口后浸 泡于75％酒精中15秒； (2)种子培养：将步骤(1)的种子放入经过高温蒸汽灭菌的培养基中，密封后于无 菌培养室内进行无菌培养，培养温度为23～28℃，光照或黑暗10～12h，光照强度90～ 120Lux；所述培养基为1/2MS培养基； (3)无菌苗扩繁：将步骤(2)培养得到的至少五片叶子的无菌苗，将无菌苗剪接成 段，每段都包含一个腋芽，再将每段无菌苗插入到含有激素的培养基中，腋芽不能被培养基 浸没；所述激素包括IBA和6-BA，培养基为1/2MS培养基； (4)新植株扩繁：将步骤(3)中发育成至少五片叶子的新植株，按照步骤(3)的操 作，即可完成金钟藤无性扩繁。 较佳的，步骤(3)中，每段无菌苗腋芽旁边的叶片剪去2/3，形态学下段插入预先高 温蒸汽灭菌的含有激素的培养基中。 本发明金钟藤无性扩繁的方法具有以下的有益效果： 1、本发明采用75％的酒精浸泡种子，可以减少种子霉变几率，再将种子尖端开边 3 CN 111543326 A 说　明　书 2/5 页 长1～2毫米的小口，不仅破除了金钟藤种子硬实对种子的影响，切口尺寸的要求还保证了 子叶不会徒长，子叶胚轴不会断开，从而提高种子发芽率和实生苗的存活率。 2、本发明采用长到至少五片叶子的无菌苗进行扩繁，无菌苗中的茎和腋芽的成熟 度已达到扩繁的要求，扩繁后的叶片不会泛黄，叶片长大后能保持葱绿。 3、本发明幼苗培养120天左右会由原来的植株茎段产生愈伤组织，愈伤组织再分 化产生新的根、茎、叶，形成完整植株，该植株与母株和其他分株基因型完全相同，且该植株 可再次剪切形成新的植株苗，在一定时间内获得几何倍数的同一基因型实验材料。 4、本发明解决了传统扦插体系成活率低、种子实生苗发芽率低且后代产生性状分 离的问题，节约了优良品种的材料，本发明扩繁中使用的培养基配方可以使任意一个具有 优良性状的金钟藤基因型个体大量快速无性繁殖，使该基因型个体在一定时间后产生大量 同基因型植株。 附图说明 图1为本发明种子剪破种皮培养图；其中：A为本发明尺寸切口剪破种皮培养图，B 为切口过小种子培养图； 图2为本发明植苗五片叶子左右时可进行剪切扩大繁殖时的状态； 图3为本发明剪切后产生愈伤组织并分化出新芽新叶时的状态； 图4为本发明最终扩繁完成的生命力旺盛的无性系植株； 图5为本发明最终扩繁完成的生命力旺盛的无性系植株。