技术摘要：
本发明公开了一种降低化肥用量的复合微生物酵素及其制备方法，准备原料，各原料占总重量百分比为：大豆汁3％，鱼浸膏3％，蔬菜10％，红糖5‑10％，其余为水；混合后放入密闭容器，填充度80％，前期温度45℃发酵，每隔8小时采用内置搅拌器搅拌20分钟并放气，直至pH降为4  全部
背景技术：
目前普遍使用的施肥方案是化学肥料配合土杂肥与商品有机肥，但是由于施肥量 大，在当前人工成本高、肥料价格偏高、但农产品价格不高的形式下，农民收益普遍较低。目 前肥料成本约占整个农业生产成本的50％以上，节约肥料的施用量能极大提高农产品的收 益率。且化学肥料使用有局限性，如果使用方法不当容易造成土壤板结和烧籽烧苗现象；如 若使用时期不当,也会造成倒伏、贪青晚熟的现象。土杂肥和商品有机肥虽然肥效稳定，具 有改善土壤结构、提高农产品品质的作用，但由于施肥量大，导致劳动力和机械成本过高。 N,P,K是植物生长所需求的主要营养元素。土壤中磷元素和钾元素并不缺乏，只是土壤中的 P，K处于难溶解或者矿化的状态，无法被植物直接吸收。近年来研究表明，内生于某些植物 体内的内生菌可以难溶解和矿化的P、K转化为可被植物吸收的营养成分。目前越来越多的 研究表明某些植物的内生菌具有固氮功能，可以利用空气中的N2，起到少施甚至不施氮肥的 作用[4]。除此之外，植物内生微生物还具有分泌促进植物生长的促生物质，抑制植物病原菌 生长，辅助补充植物所需的其它养分的作用。更有很多微生物兼具溶磷、解钾、固氮、分泌促 生物质、抑菌这5项功效中的两种及两种以上的能力。这就为我们利用植物发酵生产促生酵 素提供了坚实的理论基础。本发明旨在利用天然植物的内生菌发酵生产复合微生物酵素， 以期达到降低化肥、土杂肥和有机肥施用量，促进植物生长，提高农产品品质，降低农业生 产价格成本和劳动力成本，提高农产品收益的目的。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种复合微生物酵素制备及其在苹果生产上的应用的方 法，本发明的有益效果是能够减少常规肥料(化肥、土杂肥、商品有机肥)施用量，并且提高 苹果果实品质和提高产量。 本发明一种降低化肥用量的复合微生物酵素各原料占总重量百分比为：大豆汁 3％，鱼浸膏3％，蔬菜10％，红糖5-10％，其余为水。 本发明复合微生物酵素制备方法按照以下步骤进行： 步骤1：准备原料，各原料占总重量百分比为：大豆汁3％，鱼浸膏3％，蔬菜10％，红 糖5-10％，其余为水； 步骤2：混合后放入密闭容器，填充度80％，前期温度45℃发酵，每间隔8小时采用 内置搅拌器搅拌20分钟并放气，直至pH降为4.0； 步骤3：再置于自然温度下室温静置发酵至pH为3.6-3.9，并不再下降为止。该复合 酵素经培养可在MRS培养基上生长出以乳酸杆菌为主导的菌群，菌体密度达到108CFU/mL以 上(图1)。经16S  rDNA  V3-V4区宏基因组测序,表明该发酵液形成以乳酸杆菌和醋酸杆菌为 3 CN 111592391 A 说　明　书 2/4 页 主导的菌群。该酵素发酵所需的蔬菜外植体经过0.1％升汞消毒，无菌水冲洗后，其切口处 能够产生可以在以Ca3(PO4)2为唯一P源、钾长石为唯一钾源培养基和无氮培养基上生长的 细菌群落，并可在无氮培养基上产生透明圈(图2)，表明该植物内生菌具有解磷溶钾和固氮 的功效，在发酵过程中的某些阶段所含有的细菌可以在Ca3(PO4)2、钾长石培养基和无氮培 养基上生长，并在无氮培养基和以磷酸钙为唯一磷源的培养基上形成透明圈(图3)，表明该 复合酵素具有溶磷解钾固氮的效果。经HPLC分析该酵素含有微量GA和IAA(图4)。 步骤4：该酵素用于苹果生产的使用方法：1)九月下旬，每亩地使用5公斤酵素 10 公斤全营养剂冲施。2)春季萌芽前，每亩地使用酵素4公斤冲施，可促进萌芽整齐，增加幼果 细胞分裂数量，促进果实早期膨大。3)落花后20天，每亩地使用酵素3公斤加全营养剂6公斤 冲施，促进新稍萌发和果实中期膨大，保持果面光洁，增强植物抗病性。4)7月上旬，使用酵 素2公斤加全营养剂2公斤冲施，维持雨季不脱肥，树体健壮生长。5)8月下旬，使用酵素1公 斤加全元素营养剂10公斤冲施，满足第二次果实快速膨大营养需求；6)从萌芽前到落叶前， 果树发育期可以间隔15-20天喷洒200倍复合微生物酵素，减轻叶部病虫害发生，增强叶绿 素生成和光合效能提升。 此管理方案每年每亩地投入780余元，使用酵素后，大幅度降低肥料的使用量，每 亩地全年全营养剂施用量不超过28公斤，省掉施用成吨的土杂肥和商品有机肥，节约人力 投入。(与本方法对比的常规施肥方法：1、秋施基肥：九月下旬每亩地使用土杂肥3方，商品 有机肥400公斤，中微量元素肥料100公斤，高钾复合肥100公斤；2、萌芽前每亩地100公斤碳 铵；3、6月下旬每亩地平衡型水溶肥20公斤；4、8月上旬每亩地使用低氮高磷高钾复合肥100 公斤，每亩地每年投入1800元。) 附图说明 图1是步骤3的发酵液，在MRS培养基上形成以乳酸菌为主导的菌群； 图2是所述蔬菜经升汞消毒无菌水冲洗后，其切口处能够产生可以在以Ca3(PO4)2 为唯一P源、钾长石为唯一钾源培养基和无氮培养基上生长的细菌群落，并在无氮培养基上 形成透明圈； 图3是发酵液在发酵过程中某些阶段的菌落可以在磷酸钙培养基，钾长石培养基， 无氮培养基上生长或者能够生长并形成透明圈； 图4是发酵液经HPLC分析证明其含有微量的促生激素IAA,GA； 图5是施用复合微生物酵素与普通肥水管理的新疆红富士苹果的品质比较。其中a 为复合微生物酵素管理的红富士苹果，b为普通肥水管理的苹果，c为酵素种植的苹果与普 通肥水管理苹果横截面对比图。