技术摘要：
本发明公开的属于食品加工技术领域，具体为植物乳杆菌及其在具有缓解便秘功效的果蔬酵素中的应用，其包括：植物乳杆菌及其在具有缓解便秘功效的果蔬酵素中的应用。该植物乳杆菌具有产酸性强、耐酸性强、可抑制病原菌的特性，命名为植物乳杆菌JYL008，其保藏号为CGMCC N  全部
背景技术：
生物发酵饮料是新型的保健饮料，采用发酵技术使物料在发酵过程中形成某些新 营养成分，以增加一些新的功效。发酵果蔬汁是指以或多种新鲜果蔬为原料，经多种或单一 乳酸菌发酵而成的果蔬汁类饮料。其利用微生物发酵萃取天然果蔬原料精华，浓缩了微生 物代谢生成的有机酸、功能性低聚糖、多肽等功能成分。发酵果蔬汁为具有特殊风味的乳酸 发酵制品，不添加任何防腐剂，有良好的感官品质，其成本低廉、原料多样、食用方便。 乳酸菌是人和动物肠道内重要的生理性有益菌。乳酸菌进入宿主肠道后，可特异 性的黏附定植于肠粘膜表面形成生物膜。一方面通过空间占位作用抑制病原菌的粘附和侵 入，另一方面可通过代谢产生细菌素或有机酸等物质抑制致病菌的生长和繁殖，发挥其有 益的生理促进作用。但大多数乳酸菌对外界环境耐受能力差，作为有效的益生菌菌株必须 能够通过低pH值的胃液、且具有一定的胆盐的耐受性。当到达肠道的乳酸菌具有一定数量 及活性时，才能产生人体生长发育必须的维生素、氨基酸等营养物质；才能调节肠道内环 境，减少病理性菌群数量，增加肠动力。 发酵果蔬汁对缓解便秘难题具有一定功效。一方面是因为发酵果蔬汁富含有机 酸、低聚糖、膳食纤维等，功能性便秘和肥胖都被证明与膳食纤维摄入较少有关。膳食纤维 作为不能被人体消化的碳水化合物，可以分成两个基本类型：不溶性膳食纤维(IDF)和可溶 性膳食纤维(SDF)。水溶性膳食纤维能增加粪便持水能力，水不溶性膳食纤维能促进肠道蠕 动，二者均能起到润肠通便的作用，进而改善便秘。另一方面是益生菌的作用，乳酸菌在肠 道内定植后，代谢产生有机酸，能够使肠腔的pH降低，具有润肠通便功效，促进肠道正常功 能恢复；同时，乳酸菌定植在肠道上皮细胞，与其他致病菌竞争肠道位点，抑制肠道内病原 菌的滋生，改善肠道菌群微环境，促进排便。
技术实现要素：
本部分的目的在于概述本发明的实施方式的一些方面以及简要介绍一些较佳实 施方式。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使 本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范 围。 本发明的目的是提供产酸、耐酸能力强，可有效抑制多种致病菌的乳杆菌，同时， 还提供了利用该乳杆菌在具有缓解便秘功效的果蔬酵素中的应用。解决了果蔬汁容易变 质、有青臭味等缺点，也避免了传统果蔬发酵中含盐量高以及杂菌污染而导致食物中毒的 风险，并发现了缓解便秘问题的配方、发酵菌种以及发酵条件，达到了发酵时间短、发酵风 味好，对调节肠道微环境、缓解便秘起到很好的效果。 3 CN 111607534 A 说　明　书 2/6 页 为解决上述技术问题，根据本发明的一个方面，本发明提供了如下技术方案： 本发明公开了产酸、耐酸能力强的乳酸菌，其菌落形态特征：将菌种划线接种于 MRS培养基上，37℃培养36h，菌落直径2-3mm，菌落圆形隆起，颜色为乳白色，不透明，菌落边 缘光滑，无不规则，显微镜检菌体呈现短杆状，过氧化氢酶试验阴性，发酵液有明显乳酸风 味。 进一步，本发明提供的乳酸菌为植物乳杆菌(Lactobacillus  plantarum)。于2019 年11月19日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地点为北京市朝 阳区北辰西路1号院3号。保藏编号为CGMCC  No.18968，名称为植物乳杆菌JYL008。 对该株菌进行16S  rRNA测序，测序结果有如SEQ.ID.NO1所示的核苷酸序列。 进一步，本发明中，该植物乳杆菌的产酸能力较强，2％(v/v)接种量接种于MRS液 体培养基(pH调至6.2)中培养24h，每2h检测一次pH，实验结果表明培养6-16h内，pH呈现急 速下降，pH＝3.7-3.8趋于平稳。产酸能力强，使发酵环境呈酸性，能够有效抑制腐败微生物 的生长，从而使发酵更利于防腐。 进一步，本发明该植物乳杆菌的耐酸能力较强。用0.1mol/L的盐酸将生理盐水的 初始pH调整至1.5；2.5和3.5，2％(v/v)接种量接种JYL008于三种pH的生理盐水中开始计 时，取0h、1h、2h、3h的待测液进行平板活菌计数，结果表明，在pH为2.5和3.5的培养基中， JYL008存活率维持在较高水平，当pH＝1 .5时，JYL008存活率明显下降，3h后存活率为 54.3％。从整体看来，该植物乳杆菌JYL008的酸适应能力强，饮用后可保障进入肠道的数量 以及活力，进一步定植肠道，可调节肠道内环境，产生短链脂肪酸，γ-氨基丁酸等营养成 分，提升肠动力。 进一步，本发明对该植物乳杆菌的抑菌能力进行研究。用牛津杯法检测该菌发酵 液对于致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌)的抑菌圈，实验结果表明JYL008对这 三种致病菌有明显的抑制作用，抑菌圈直径均大于10mm。饮用后可调节肠道菌群，从而改善 胃肠道功能，增强免疫力。 本发明还提供该植物乳杆菌在具有缓解便秘功效的果蔬酵素中的应用，主要包括 以下步骤： 将果蔬按照配方进行清洗、消毒、破碎，一次加料为固体辅料糖醇，二次加料为水 果发酵原液，研磨两次，植入活化的植物乳杆菌JYL008进行搅拌，倒入已灭菌的发酵罐中， 进行无氧发酵，制得活菌型果蔬酵素，对其缓解便秘的功效进行验证。 (1)进一步，本发明的优选方案：所述的果蔬原料均为有机果蔬，种类及比例为：胡 萝卜30-50％、地瓜5％-15％、番茄10％-20％、花椰菜5％-15％、红根甜菜5％-25％、丝瓜 10％-15％。果蔬优选为新鲜脆嫩、无腐烂、无病虫害的果蔬。切成长10cm左右的块状，方便 清洗破碎。 (2)进一步，本发明的优选方案：所述果蔬预处理是指果蔬按配比称取，用臭氧水 进行清洗两次，臭氧熏蒸30min，尽可能多的消除果蔬表面杂菌，避免致病菌残留。用破碎机 将果蔬破碎，加入1.6倍重量无菌水。 (3)进一步，本发明的优选方案：所述辅料是指优选纯度＞99％的木糖醇、麦芽糖 醇作为辅料。按果蔬汁总重的5％加入木糖醇，15％加入麦芽糖醇，添加前紫外熏蒸30- 60min，目的是将辅料杀菌消毒，防止添加过程带入杂菌。 4 CN 111607534 A 说　明　书 3/6 页 (4)进一步，本发明的优选方案：所述水果发酵原液是指利用乳酸菌、醋酸菌、酵母 菌混合菌剂发酵水果，水果原料优选以菠萝为主，还包括木瓜、苹果、猕猴桃、葡萄等水果中 的或几种，发酵至pH＝3.0-3.5停止。 (5)进一步，本发明的优选方案：所述水果发酵原液预处理是指水果发酵原液进行 巴氏灭菌，冷却后按果蔬汁和辅料总重的10％加入，目的是调节果蔬汁酸碱度，控制初始发 酵pH＝4.1-4.6，可抑制果蔬汁残留的不耐酸杂菌生长，确保发酵全过程无致病菌干扰。 (6)进一步，本发明的优选方案：所述研磨是指果蔬基质二次加料后，需要进行2次 研磨，优选消毒处理过的研磨机进行研磨，最终得到粒径小于2mm的果蔬匀浆，利于乳酸菌 充分发酵获得营养成分高的果蔬酵素。 (7)进一步，本发明的优选方案：所述乳酸菌是指用单一菌株植物乳杆菌JYL008， 活化乳酸菌的方法为：将-80℃保藏的JYL008接种于MRS液体培养基中，于37℃培养18-24h， 得到的菌液再转接于MRS液体培养基中，如此反复2-3次，得到活化的乳酸菌。 (8)进一步，本发明的优选方案：所述发酵罐是指密封效果好的微生物发酵装置， 防止外来微生物入侵，确保接入容器内具有良好的厌氧环境，供乳酸菌充分生长代谢。 (9)进一步，本发明的优选方案：所述发酵温度优选26-30℃，发酵时间优选72- 96h。该发酵条件下果蔬酵素的活菌数量较高，酸度适中、口感最佳。 与现有技术相比： 1、利用植物乳杆菌JYL008作为发酵菌种，该菌种具有产酸能力强，耐酸性能强，且 可抑制病原菌的特性，有利于通过胃液，顺利在肠道定植发挥功效。乳酸菌利用原料的可溶 性物质代谢产生多种氨基酸、维生素和酶；提高了果蔬汁的营养价值。 2、发酵前在果蔬汁中添加水果发酵原液，将初始发酵pH控制在4.1-4.6之间，有效 控制杂菌滋生，使产品质量稳定。 3、乳酸菌发酵果蔬汁产生大量的乳酸，对发酵果蔬汁风味形成有重要意义。因为 乳酸本身就是较好的调味剂，其酸味较醋酸柔和、爽口，可使果蔬汁独具风味，相比纯果蔬 汁更能被大众接受。 4、本产品为低糖产品，选用糖醇来增加果蔬汁甜度，糖醇热量低且对人体血糖值 上升基本无影响，作为安全的甜味剂、营养补充剂，被大众接受。 附图说明 图1为YL008显微镜检(10*100)示意图； 图2为JYL008菌落形态图； 图3为JYL008产酸能力曲线图； 图4为JYL008耐酸能力曲线图。