技术摘要：
本发明公开了一种纳米乳液药物载体及其制备方法与应用。本发明利用β‑环糊精具有增加疏水性药物水溶性的性能，将其接枝到具有生物粘附性的壳聚糖季铵盐上，对他克莫司或其他疏水性药物进行负载，再利用聚阳离子与聚阴离子通过静电作用形成聚电解质复合物的原理，将负 全部
背景技术：
干眼症是泪液和眼表面的多因素疾病，表现为眼部不适、视觉障碍和泪膜不稳定， 并对眼表面造成潜在损害，常常与眼表面炎症相关。干眼症看似一个小问题，但影响着人们 的生活质量，已经是一个日益严重的公共健康问题，促使数百万人寻求眼科护理。其发病机 制十分复杂，各种诱因可通过不同的途径影响泪腺的正常功能，泪液的减少使眼表处于相 对干燥的环境，导致对眼表神经的过量刺激，同时激活了自身免疫机制，引发眼表和泪腺的 免疫性炎症，导致眼表上皮的实质性损害。临床上干眼症的治疗主要为局部滴人工泪液或 使用促泪液分泌的药物等，人工泪液可以缓解轻度干眼症患者眼表干涩的症状，暂时稳定 泪膜。作为传统的眼用制剂，滴眼剂虽然配制过程简单，给药方便，作用也迅速，但因为药物 以溶液形式存在，无生物粘附性，因而容易被泪液稀释并随着泪液从泪道排出，导致生物利 用度较低，同时，药物的作用时间也非常短，这就意味着需要频繁给药，极为不便。另外，眼 膏剂因其粘度较大，延长了药物在眼部的滞留时间，从而提高了生物利用度。但在眼膏剂 中，由于水溶性药物以晶粒形式存在，只有接触到泪液时才溶解，意味着药物的有效浓度降 低，且眼膏剂基质会使眼部产生异物感，加上透明度差造成视力受到影响，导致病人的顺应 性差。相对之下，近年出现的眼科药物缓释系统提供了新型的给药方法，正逐渐显示其独特 的优势和前景，其中包括胶粒系统如聚合物胶束、微乳、脂质体等；微粒系统如纳米粒、纳米 囊、纳米混悬剂、微球、纳米结构脂质载体和固体脂质纳米粒等；凝胶系统如原位凝胶和生 物黏附性凝胶等；插入剂与植入剂等。 自从认识到炎症在干眼症中的作用，针对干眼症眼表免疫性治疗成为治疗干眼症 的一个新的方向。他克莫司(FK506)为临床上常见使用的免疫抑制剂，能够抑制眼部表面炎 性介质的表达，从而恢复健康泪膜的分泌，减少症状和体征，达到治疗干眼症的效果。而他 克莫司是一种高亲脂性大环内酯，其疏水性和相对高分子量使得它很难以溶解的形式存在 于角膜表面，这阻碍了它在角膜和结膜的转运或渗透。此外，鼻泪管引流、泪液冲洗、局部溶 液的短停留时间更是降低了他克莫司的生物利用度。因此，需要开发能够改善药物溶解度、 增强渗透性和延长角膜前停留时间的眼科药物载体及制剂。
技术实现要素：
为解决现有技术的缺点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种纳米乳液药 物载体的制备方法。该制备方法是利用β-环糊精具有增加疏水性药物水溶性的性能，将其 接枝到具有生物粘附性的壳聚糖季铵盐上，再利用聚阳离子与聚阴离子通过静电作用形成 聚电解质复合物的原理，将β-环糊精-壳聚糖季铵盐与羧甲基纤维素钠溶液结合，得到米乳 液药物载体。 4 CN 111603445 A 说 明 书 2/8 页 本发明的另一目的在于提供上述制备方法制备得到的一种纳米乳液药物载体。 本发明的另一目的在于提供上述一种纳米乳液药物载体的应用。 本发明的再一目的在于提供一种他克莫司纳米乳滴眼液及其制备方法，该他克莫 司纳米乳滴眼液是利用β-环糊精具有增加疏水性药物水溶性的性能，将其接枝到具有生物 粘附性的壳聚糖季铵盐上，对他克莫司进行负载，再利用聚阳离子与聚阴离子通过静电作 用形成聚电解质复合物的原理，将负载了他克莫司的β-环糊精-壳聚糖季铵盐与羧甲基纤 维素钠溶液结合，得到载药聚电解质复合物纳米乳滴眼液。该滴眼液具有良好的生物相容 性，对人体安全无毒性作用，可以治疗干眼症。 本发明目的通过以下技术方案实现： 一种纳米乳液药物载体的制备方法，包括以下步骤： (1)以溶剂为反应介质，将β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐在60～90℃下反应8～ 12h，沉淀，洗涤，抽滤，干燥，得到β-环糊精顺丁烯二酸单酯(CM)； (2)将β-环糊精顺丁烯二酸单酯溶于水，加入交联剂活化2～3h，然后加入壳聚糖 季铵盐(HACC)水溶液，室温反应12～36h，透析，冻干，得到β-环糊精顺丁烯二酸单酯接枝壳 聚糖季铵盐(CMH)； (3)将羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶于水中，酸化1～2h，将壳聚糖和β-环糊精顺丁 烯二酸单酯接枝壳聚糖季铵盐(CMH)混合均匀后加入到酸化后的体系中，搅拌，得到纳米乳 液药物载体。 优选的，步骤(1)所述溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、吡啶和二甲基亚砜中的至少一 种。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐的摩尔比为1：(1～2)。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)在溶剂中的浓度为0.1～0.2mol/L。 优选的，步骤(1)所述反应β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐加入溶剂后，可以先在 室温下搅拌至完全溶解，再升温反应。 优选的，步骤(1)所述沉淀所用的沉淀剂为二氯甲烷，所述洗涤所用的洗涤剂为丙 酮，所述干燥为真空干燥。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯溶于水所得溶液的浓度为4～ 8wt％。 优选的，步骤(2)所述交联剂为N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)- 3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)的混合物，其中NHS与EDC的质量比为1：(1～3)。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯与交联剂的摩尔比为(2～4)：1。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯与壳聚糖季铵盐水溶液中的壳聚 糖季铵盐单体的摩尔比为(1～2)：1。 优选的，步骤(2)所述壳聚糖季铵盐(HACC)水溶液的浓度为3～6wt％ 优选的，步骤(2)所述透析指在水中透析2～3次，每次透析12～24h；所述冻干的条 件为：-90℃的冷冻干燥机中干燥24～36h。 优选的，步骤(3)所述羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶于水所得溶液的浓度为1～ 2wt％。 优选的，步骤(3)所述酸化指向体系中加入浓度为18.2～36.5wt％的盐酸进行酸 5 CN 111603445 A 说 明 书 3/8 页 化，其中盐酸与羧甲基纤维素钠水溶液的体积比为(1～2)：30。 优选的，步骤(3)所述羧甲基纤维素钠与壳聚糖的质量比为1：(1～2)；所述壳聚糖 和β-环糊精顺丁烯二酸单酯接枝壳聚糖季铵盐的质量比为1：(0.25～0.5)。 优选的，步骤(3)所述搅拌的转速为1000～1200rpm，时间为4～10h。 上述方法制得的一种纳米乳液药物载体。 上述一种纳米乳液药物载体的应用。 一种他克莫司纳米乳滴眼液的制备方法，包括以下步骤： (1)以溶剂为反应介质，将β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐在60～90℃下反应8～ 12h，沉淀，洗涤，抽滤，干燥，得到β-环糊精顺丁烯二酸单酯(CM)； (2)将β-环糊精顺丁烯二酸单酯溶于水，加入交联剂活化2～3h，然后加入壳聚糖 季铵盐(HACC)水溶液，室温反应12～36h，透析，冻干，得到β-环糊精顺丁烯二酸单酯接枝壳 聚糖季铵盐(CMH)； (3)在搅拌状态下，将他克莫司(FK506)乙醇溶液加入到β-环糊精顺丁烯二酸单酯 接枝壳聚糖季铵盐水溶液中，超声，搅拌，离心收集溶液，冷冻干燥，得到他克莫司包含物； (4)将羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶于水中，酸化1～2h，将壳聚糖(CS)和他克莫司 包含物混合均匀后加入到酸化后的体系中，搅拌，得到他克莫司纳米乳滴眼液。 优选的，步骤(1)所述溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、吡啶和二甲基亚砜中的至少一 种。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐的摩尔比为1：(1～2)。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)在溶剂中的浓度为0.1～0.2mol/L。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐加入溶剂后，可以先在室温 下搅拌至完全溶解，再升温反应。 优选的，步骤(1)所述沉淀所用的沉淀剂为二氯甲烷，所述洗涤所用的洗涤剂为丙 酮。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯溶于水所得溶液的浓度为4～ 8wt％。 优选的，步骤(2)所述交联剂为N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)- 3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)混合物，其中NHS与EDC的质量比为1：(1～3)。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯与交联剂的摩尔比为(2～4)：1。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯与壳聚糖季铵盐水溶液中的壳聚 糖季铵盐单体的摩尔比为(1～2)：1。 优选的，步骤(2)所述壳聚糖季铵盐(HACC)水溶液的浓度为3～6wt％。 优选的，步骤(2)所述透析指在水中透析2～3次，每次透析12～24h；所述冻干的条 件为：-90℃的冷冻干燥机中干燥24～36h。 优选的，步骤(3)所述他克莫司乙醇溶液的浓度为2～4wt％；所述β-环糊精顺丁烯 二酸单酯接枝壳聚糖季铵盐水溶液的浓度为9.8～19.6wt％。 优选的，步骤(3)所述他克莫司乙醇溶液中的他克莫司与β-环糊精顺丁烯二酸单 酯接枝壳聚糖季铵盐水溶液中的β-环糊精顺丁烯二酸单酯接枝壳聚糖季铵盐的质量比为 1:(49～98)。 6 CN 111603445 A 说 明 书 4/8 页 优选的，步骤(3)所述加入指在2～10min内将他克莫司乙醇溶液滴加到β-环糊精 顺丁烯二酸单酯接壳聚糖季铵盐水溶液中。 优选的，步骤(3)所述超声时间为5～10min；搅拌时间为12～24h。 优选的，步骤(3)所述冷冻干燥的条件为：-90℃的冷冻干燥机中干燥24～36h。 优选的，步骤(4)所述羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶于水所得溶液的浓度为1～ 2wt％。 优选的，步骤(4)所述酸化指向体系中加入浓度为18.2～36.5wt％的盐酸进行酸 化，其中盐酸与羧甲基纤维素钠水溶液的体积比为(1～2)：30。 优选的，步骤(4)所述羧甲基纤维素钠与壳聚糖的质量比为1：(1～2)；所述壳聚糖 和他克莫司包含物的质量比为(2～4)：1。 优选的，步骤(4)所述搅拌的转速为1000～1200rpm，时间为4～10h。 上述方法制得的一种他克莫司纳米乳滴眼液。 上述一种他克莫司纳米乳滴眼液在药物制备中的应用。 本发明所用壳聚糖是由单体β-(1-4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖构成的碱性多糖， 无刺激作用，具有良好的生物相容性、生物粘附性和生物可降解性，其降解产物无毒，能被 生物体完全吸收，作为理想药物载体一直受到广泛关注。β-环糊精分子因其独特的结构而 使β-环糊精外侧呈亲水性，而内侧为疏水空腔，可以以此来包含疏水性的化合物分子，从而 增加化合物的溶解性。该纳米乳滴眼液将β-环糊精接枝到具有生物粘附性的壳聚糖季铵盐 上，对他克莫司等疏水性的药物进行负载，具有一定的缓释功能，再利用聚阳离子与聚阴离 子通过静电作用形成聚电解质复合物的原理，将负载了他克莫司等疏水性的药物的β-环糊 精-壳聚糖季铵盐与羧甲基纤维素钠溶液结合，得到载药聚电解质复合物纳米乳滴眼液，实 现双重缓释，达到长效治疗。 与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果： (1)本发明利用β-环糊精接枝到生物粘附性好的壳聚糖季铵盐上，再利用β-环糊 精的疏水空腔结构负载上他克莫司等疏水性药物，再与羧甲基纤维素钠溶液结合，得到载 药聚电解质复合物纳米乳滴眼液或其他药物制剂，其具有良好的生物相容性，实现双重缓 释，可达到长效治疗的效果。 (2)本发明制备的他克莫司纳米乳滴眼液，稳定性好，粒径均一，安全无毒性作用， 生物粘附性好，从而降低用药频率，提高生物利用度。 (3)本发明制备的纳米乳液药物载体，不仅适用于他克莫司，还可适用其他疏水性 的小分子药物，具有广泛的应用。 附图说明 图1为实施例1所得的β-环糊精顺丁烯二酸单酯接壳聚糖季铵盐的红外谱图。 图2为实施例1所得的他克莫司纳米乳滴眼液的DSC谱图，其中CMC-Na为羧甲基纤 维素钠，CS为壳聚糖，FK506为他克莫司。 图3为实施例1所得的他克莫司纳米乳滴眼液和实施例6所得纳米乳液药物载体 (无FK506乳液)的粒径电位图。 图4为实施例7中药物缓释效果。 7 CN 111603445 A 说 明 书 5/8 页 图5为实施例8中细胞毒性结果。
本发明公开了一种纳米乳液药物载体及其制备方法与应用。本发明利用β‑环糊精具有增加疏水性药物水溶性的性能，将其接枝到具有生物粘附性的壳聚糖季铵盐上，对他克莫司或其他疏水性药物进行负载，再利用聚阳离子与聚阴离子通过静电作用形成聚电解质复合物的原理，将负 全部
背景技术：
干眼症是泪液和眼表面的多因素疾病，表现为眼部不适、视觉障碍和泪膜不稳定， 并对眼表面造成潜在损害，常常与眼表面炎症相关。干眼症看似一个小问题，但影响着人们 的生活质量，已经是一个日益严重的公共健康问题，促使数百万人寻求眼科护理。其发病机 制十分复杂，各种诱因可通过不同的途径影响泪腺的正常功能，泪液的减少使眼表处于相 对干燥的环境，导致对眼表神经的过量刺激，同时激活了自身免疫机制，引发眼表和泪腺的 免疫性炎症，导致眼表上皮的实质性损害。临床上干眼症的治疗主要为局部滴人工泪液或 使用促泪液分泌的药物等，人工泪液可以缓解轻度干眼症患者眼表干涩的症状，暂时稳定 泪膜。作为传统的眼用制剂，滴眼剂虽然配制过程简单，给药方便，作用也迅速，但因为药物 以溶液形式存在，无生物粘附性，因而容易被泪液稀释并随着泪液从泪道排出，导致生物利 用度较低，同时，药物的作用时间也非常短，这就意味着需要频繁给药，极为不便。另外，眼 膏剂因其粘度较大，延长了药物在眼部的滞留时间，从而提高了生物利用度。但在眼膏剂 中，由于水溶性药物以晶粒形式存在，只有接触到泪液时才溶解，意味着药物的有效浓度降 低，且眼膏剂基质会使眼部产生异物感，加上透明度差造成视力受到影响，导致病人的顺应 性差。相对之下，近年出现的眼科药物缓释系统提供了新型的给药方法，正逐渐显示其独特 的优势和前景，其中包括胶粒系统如聚合物胶束、微乳、脂质体等；微粒系统如纳米粒、纳米 囊、纳米混悬剂、微球、纳米结构脂质载体和固体脂质纳米粒等；凝胶系统如原位凝胶和生 物黏附性凝胶等；插入剂与植入剂等。 自从认识到炎症在干眼症中的作用，针对干眼症眼表免疫性治疗成为治疗干眼症 的一个新的方向。他克莫司(FK506)为临床上常见使用的免疫抑制剂，能够抑制眼部表面炎 性介质的表达，从而恢复健康泪膜的分泌，减少症状和体征，达到治疗干眼症的效果。而他 克莫司是一种高亲脂性大环内酯，其疏水性和相对高分子量使得它很难以溶解的形式存在 于角膜表面，这阻碍了它在角膜和结膜的转运或渗透。此外，鼻泪管引流、泪液冲洗、局部溶 液的短停留时间更是降低了他克莫司的生物利用度。因此，需要开发能够改善药物溶解度、 增强渗透性和延长角膜前停留时间的眼科药物载体及制剂。
技术实现要素：
为解决现有技术的缺点和不足之处，本发明的首要目的在于提供一种纳米乳液药 物载体的制备方法。该制备方法是利用β-环糊精具有增加疏水性药物水溶性的性能，将其 接枝到具有生物粘附性的壳聚糖季铵盐上，再利用聚阳离子与聚阴离子通过静电作用形成 聚电解质复合物的原理，将β-环糊精-壳聚糖季铵盐与羧甲基纤维素钠溶液结合，得到米乳 液药物载体。 4 CN 111603445 A 说 明 书 2/8 页 本发明的另一目的在于提供上述制备方法制备得到的一种纳米乳液药物载体。 本发明的另一目的在于提供上述一种纳米乳液药物载体的应用。 本发明的再一目的在于提供一种他克莫司纳米乳滴眼液及其制备方法，该他克莫 司纳米乳滴眼液是利用β-环糊精具有增加疏水性药物水溶性的性能，将其接枝到具有生物 粘附性的壳聚糖季铵盐上，对他克莫司进行负载，再利用聚阳离子与聚阴离子通过静电作 用形成聚电解质复合物的原理，将负载了他克莫司的β-环糊精-壳聚糖季铵盐与羧甲基纤 维素钠溶液结合，得到载药聚电解质复合物纳米乳滴眼液。该滴眼液具有良好的生物相容 性，对人体安全无毒性作用，可以治疗干眼症。 本发明目的通过以下技术方案实现： 一种纳米乳液药物载体的制备方法，包括以下步骤： (1)以溶剂为反应介质，将β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐在60～90℃下反应8～ 12h，沉淀，洗涤，抽滤，干燥，得到β-环糊精顺丁烯二酸单酯(CM)； (2)将β-环糊精顺丁烯二酸单酯溶于水，加入交联剂活化2～3h，然后加入壳聚糖 季铵盐(HACC)水溶液，室温反应12～36h，透析，冻干，得到β-环糊精顺丁烯二酸单酯接枝壳 聚糖季铵盐(CMH)； (3)将羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶于水中，酸化1～2h，将壳聚糖和β-环糊精顺丁 烯二酸单酯接枝壳聚糖季铵盐(CMH)混合均匀后加入到酸化后的体系中，搅拌，得到纳米乳 液药物载体。 优选的，步骤(1)所述溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、吡啶和二甲基亚砜中的至少一 种。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐的摩尔比为1：(1～2)。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)在溶剂中的浓度为0.1～0.2mol/L。 优选的，步骤(1)所述反应β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐加入溶剂后，可以先在 室温下搅拌至完全溶解，再升温反应。 优选的，步骤(1)所述沉淀所用的沉淀剂为二氯甲烷，所述洗涤所用的洗涤剂为丙 酮，所述干燥为真空干燥。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯溶于水所得溶液的浓度为4～ 8wt％。 优选的，步骤(2)所述交联剂为N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)- 3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)的混合物，其中NHS与EDC的质量比为1：(1～3)。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯与交联剂的摩尔比为(2～4)：1。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯与壳聚糖季铵盐水溶液中的壳聚 糖季铵盐单体的摩尔比为(1～2)：1。 优选的，步骤(2)所述壳聚糖季铵盐(HACC)水溶液的浓度为3～6wt％ 优选的，步骤(2)所述透析指在水中透析2～3次，每次透析12～24h；所述冻干的条 件为：-90℃的冷冻干燥机中干燥24～36h。 优选的，步骤(3)所述羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶于水所得溶液的浓度为1～ 2wt％。 优选的，步骤(3)所述酸化指向体系中加入浓度为18.2～36.5wt％的盐酸进行酸 5 CN 111603445 A 说 明 书 3/8 页 化，其中盐酸与羧甲基纤维素钠水溶液的体积比为(1～2)：30。 优选的，步骤(3)所述羧甲基纤维素钠与壳聚糖的质量比为1：(1～2)；所述壳聚糖 和β-环糊精顺丁烯二酸单酯接枝壳聚糖季铵盐的质量比为1：(0.25～0.5)。 优选的，步骤(3)所述搅拌的转速为1000～1200rpm，时间为4～10h。 上述方法制得的一种纳米乳液药物载体。 上述一种纳米乳液药物载体的应用。 一种他克莫司纳米乳滴眼液的制备方法，包括以下步骤： (1)以溶剂为反应介质，将β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐在60～90℃下反应8～ 12h，沉淀，洗涤，抽滤，干燥，得到β-环糊精顺丁烯二酸单酯(CM)； (2)将β-环糊精顺丁烯二酸单酯溶于水，加入交联剂活化2～3h，然后加入壳聚糖 季铵盐(HACC)水溶液，室温反应12～36h，透析，冻干，得到β-环糊精顺丁烯二酸单酯接枝壳 聚糖季铵盐(CMH)； (3)在搅拌状态下，将他克莫司(FK506)乙醇溶液加入到β-环糊精顺丁烯二酸单酯 接枝壳聚糖季铵盐水溶液中，超声，搅拌，离心收集溶液，冷冻干燥，得到他克莫司包含物； (4)将羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶于水中，酸化1～2h，将壳聚糖(CS)和他克莫司 包含物混合均匀后加入到酸化后的体系中，搅拌，得到他克莫司纳米乳滴眼液。 优选的，步骤(1)所述溶剂为N,N-二甲基甲酰胺、吡啶和二甲基亚砜中的至少一 种。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐的摩尔比为1：(1～2)。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)在溶剂中的浓度为0.1～0.2mol/L。 优选的，步骤(1)所述β-环糊精(β-CD)和顺丁烯二酸酐加入溶剂后，可以先在室温 下搅拌至完全溶解，再升温反应。 优选的，步骤(1)所述沉淀所用的沉淀剂为二氯甲烷，所述洗涤所用的洗涤剂为丙 酮。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯溶于水所得溶液的浓度为4～ 8wt％。 优选的，步骤(2)所述交联剂为N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和1-(3-二甲氨基丙基)- 3-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)混合物，其中NHS与EDC的质量比为1：(1～3)。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯与交联剂的摩尔比为(2～4)：1。 优选的，步骤(2)所述β-环糊精顺丁烯二酸单酯与壳聚糖季铵盐水溶液中的壳聚 糖季铵盐单体的摩尔比为(1～2)：1。 优选的，步骤(2)所述壳聚糖季铵盐(HACC)水溶液的浓度为3～6wt％。 优选的，步骤(2)所述透析指在水中透析2～3次，每次透析12～24h；所述冻干的条 件为：-90℃的冷冻干燥机中干燥24～36h。 优选的，步骤(3)所述他克莫司乙醇溶液的浓度为2～4wt％；所述β-环糊精顺丁烯 二酸单酯接枝壳聚糖季铵盐水溶液的浓度为9.8～19.6wt％。 优选的，步骤(3)所述他克莫司乙醇溶液中的他克莫司与β-环糊精顺丁烯二酸单 酯接枝壳聚糖季铵盐水溶液中的β-环糊精顺丁烯二酸单酯接枝壳聚糖季铵盐的质量比为 1:(49～98)。 6 CN 111603445 A 说 明 书 4/8 页 优选的，步骤(3)所述加入指在2～10min内将他克莫司乙醇溶液滴加到β-环糊精 顺丁烯二酸单酯接壳聚糖季铵盐水溶液中。 优选的，步骤(3)所述超声时间为5～10min；搅拌时间为12～24h。 优选的，步骤(3)所述冷冻干燥的条件为：-90℃的冷冻干燥机中干燥24～36h。 优选的，步骤(4)所述羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶于水所得溶液的浓度为1～ 2wt％。 优选的，步骤(4)所述酸化指向体系中加入浓度为18.2～36.5wt％的盐酸进行酸 化，其中盐酸与羧甲基纤维素钠水溶液的体积比为(1～2)：30。 优选的，步骤(4)所述羧甲基纤维素钠与壳聚糖的质量比为1：(1～2)；所述壳聚糖 和他克莫司包含物的质量比为(2～4)：1。 优选的，步骤(4)所述搅拌的转速为1000～1200rpm，时间为4～10h。 上述方法制得的一种他克莫司纳米乳滴眼液。 上述一种他克莫司纳米乳滴眼液在药物制备中的应用。 本发明所用壳聚糖是由单体β-(1-4)-2-氨基-2-脱氧-D-葡萄糖构成的碱性多糖， 无刺激作用，具有良好的生物相容性、生物粘附性和生物可降解性，其降解产物无毒，能被 生物体完全吸收，作为理想药物载体一直受到广泛关注。β-环糊精分子因其独特的结构而 使β-环糊精外侧呈亲水性，而内侧为疏水空腔，可以以此来包含疏水性的化合物分子，从而 增加化合物的溶解性。该纳米乳滴眼液将β-环糊精接枝到具有生物粘附性的壳聚糖季铵盐 上，对他克莫司等疏水性的药物进行负载，具有一定的缓释功能，再利用聚阳离子与聚阴离 子通过静电作用形成聚电解质复合物的原理，将负载了他克莫司等疏水性的药物的β-环糊 精-壳聚糖季铵盐与羧甲基纤维素钠溶液结合，得到载药聚电解质复合物纳米乳滴眼液，实 现双重缓释，达到长效治疗。 与现有技术相比，本发明具有以下优点及有益效果： (1)本发明利用β-环糊精接枝到生物粘附性好的壳聚糖季铵盐上，再利用β-环糊 精的疏水空腔结构负载上他克莫司等疏水性药物，再与羧甲基纤维素钠溶液结合，得到载 药聚电解质复合物纳米乳滴眼液或其他药物制剂，其具有良好的生物相容性，实现双重缓 释，可达到长效治疗的效果。 (2)本发明制备的他克莫司纳米乳滴眼液，稳定性好，粒径均一，安全无毒性作用， 生物粘附性好，从而降低用药频率，提高生物利用度。 (3)本发明制备的纳米乳液药物载体，不仅适用于他克莫司，还可适用其他疏水性 的小分子药物，具有广泛的应用。 附图说明 图1为实施例1所得的β-环糊精顺丁烯二酸单酯接壳聚糖季铵盐的红外谱图。 图2为实施例1所得的他克莫司纳米乳滴眼液的DSC谱图，其中CMC-Na为羧甲基纤 维素钠，CS为壳聚糖，FK506为他克莫司。 图3为实施例1所得的他克莫司纳米乳滴眼液和实施例6所得纳米乳液药物载体 (无FK506乳液)的粒径电位图。 图4为实施例7中药物缓释效果。 7 CN 111603445 A 说 明 书 5/8 页 图5为实施例8中细胞毒性结果。
